OTRAS TÉCNICAS MOLECULARES PARA DETECCIÓN DE FIBROSIS HEPÁTICA

En el siguiente artículo encontramos una enfermedad relacionada con la fibrosis hepática, como es la  Fasciolasis hepática, otro de los causantes de la Cirrosis Hepática, en el artículo encontramos otro métodos moleculares que se realizan a partir del suero de pacientes principalmente niños de hasta 5 años

• Fas2-ELISA: El ensayo se basa en la detección de anticuerpos IgG circulantes contra el antígeno Fas2 , que es una cisteina proteinasa producida por el parásito Fasciola hepatica

• Western blot para F. hepatica: separó el antígeno en sus diferentes componentes protéicos de acuerdo al peso molecular por electroforesis en gel de poliacrilamida-SDS al 15%. Luego las proteínas fueron transferidas por electroforesis sobre un papel de nitrocelulosa, donde fue enfrentado con muestras de sueros a la dilución de 1/20 para detectar IgG específico contra el antígeno (E/S) de Fasciola hepatica. Se usó la enzima peroxidasa conjugada con anti-IgG humano a una dilución de 1/1000 para localizar el antígenoanticuerpo. Se determinó el peso molecular de fracciones proteicas del antígeno usando estándares preteñidos comerciales de bajo peso molecular de 3 a 43KD

• Arco 2: Se depositó 3.5ml de solución agar-agar al 1.2% en su fase líquida en una lámina portaobjetos dejando solidificar. Se practicaron perforaciones en que se depositaron: 5µl de solución antigénica (antígeno crudo de Fasciola hepatica), 150µl de suero problema y 50µl de suero control positivo.
• Se colocaron en una cámara húmeda por un lapso de 48horas. Las bandas de precipitación en gel se visualizaron coloreando con Amido Schwarz

FUENTE

MACO FLORES, Vicente et al. Fas2-ELISA y la técnica de sedimentación rápida modificada por lumbreras en el diagnóstico de la infección por Fasciola hepática. Rev Med Hered [online]. 2002, vol.13, n.2 [citado  2014-07-30], pp. 49-57 . Disponible en: http://www.scielo.org.pe/pdf/rmh/v13n2/v13n2ao3.pdf